硒是人体必须的微量元素之一。极谱仪 克山病、大骨节病居民体内缺硒。人群体内缺硒时，可使免疫力降低，癌症患病率升高。过量硒又能引起中毒，人有脱发、指甲改变等症状。硒有多种免疫与生物学功能，尤其是它的预防心血管病、抗肿瘤、对抗病毒性疾病以及抗衰老等的作用问题，近年来特别引起人们的关注。硒是人体必须的微量元素之一，硒对人体的营养作用以及补硒对某些疾病的防治作用显的愈发重要。硒还有刺激免疫球蛋白及抗体产生，增强机体。本文重点研究食品中的微量硒的测定方法，建立了用极谱法测定食品中的硒，具有一定的应用价值。

　　1  原理食品样经混酸消解后，使各种形态的硒变为无机硒，并与亚硫酸钠反应生成硒硇，在碘酸钾存在的条件下产生灵敏的催化波。其波高与硒含量成正比。

　　2  实验

　　2.1  仪器与试剂

　　2．1．1  仪器

　　PS4 极谱仪(齐齐哈尔医学院药学系科技创新实验室)。DTD40型消解仪，消解管外径38mm，长150mm。

　　2.1.2  试剂

　　硒标准使用溶液：吸取硒标准溶液1.0ml，定容至100ml，此液1ml含100ng硒。

　　2.1.2  消解剂

　　量取80ml优级纯硝酸与20ml优级纯高氯酸混合。硝酸：高氯酸 = 4∶1。

　　2.1.3  亚硫酸钠(10%)
 
　　称取10g 亚硫酸钠，定容至100ml。

　　2.1.4  缓冲液

　　称取20g氯化铵，5gEDTA，量取200ml 25%氨水，加水至500ml。

　　2.1.5  碘酸钾溶液(0.1%)

　　称取0.50g碘酸钾，加入20ml 25% 氨水，稀释至500ml。

　　2.1.6  硒底液

　　临用前，量取200ml缓冲液加入至500ml容量瓶中，加入50ml碘酸钾溶液，定容。

　　2.2  实验部分

　　2.2.1  样品处理

　　取消化管，消化管中加入0.200g食品样，加入1.00ml消解剂及1粒玻璃珠。将消化管放入消解仪上，160℃消解3h。取下消化管，放冷约10秒后，用加液器加入100微升双氧水，160℃恒温消解1h；消化管中加入10.0ml水，此液称样品溶液。同条件不加样品作空白实验，溶液称为样品空白溶液。

　　2.2.2  标准溶液的制备

　　取5只消化管，分别加入0、0.20、0.40、0.60、0.80ml硒标准使用溶液，各管加水至2.00ml。

　　2.2.3  空白管中加入2.00ml样品空白溶液，样品管中加入2.00ml样品溶液。空白管，样品管和标准管中加入各加入2滴高氯酸，混匀。各管加入2.0ml 10%亚硫酸钠，混匀，于室温下放置20分钟。各管加入4.00ml硒底液，混匀，可用于测量。

　　2.2.4  极谱条件

　　极谱仪，一阶导数，滴汞电极。初始电位-0.50伏，终止电位-1.1伏。扫描速度250mV/s。参考峰电位－0.82V。

　　2.2.5  测量

　　测量空白管溶液，标准管和样品管溶液。标准系列谱图见图1。

　　3  结果与讨论

　　3.1  样品消化方法

　　称取1.00g样品加入至消化管中，加入3粒玻璃珠，再加入10.0ml混酸，将消化管放入消解仪上，160℃消化30min。取下消化管，趁热将消化管中的消化液倒入10ml比色管中，静止，自然放冷，约10min后冷却至10ml比色管上层形成凝聚的脂肪球或下部已形成沉淀。定量吸取清液：用5ml吸管吸取10ml比色管的中间层清液于另一支消化管中，加入2粒玻璃珠，130℃文火消化：称取样品于消化管中，再加入3粒玻璃珠和10.0ml混酸，将消化管放入消解仪上，130℃消化1h。消化初期产生棕色烟雾，逐渐变为无色。155℃消化：155℃恒温消解至近干，如残渣显褐色，逐滴点加混酸，加热至残渣为白色。白色烟雾是残存的高氯酸。赶尽残酸和残存的氧化剂：取下消化管放冷，加入5ml水，加热至无白色烟雾，干涸，赶尽残酸，取下消化管放冷；再次加入5ml水，加热至无白色烟雾，干涸，赶尽残酸。残酸影响氢催化波测定，残存的氧化剂影响平行催化波的测定。热水溶解定容：消化管中加入10.00ml蒸馏水，加热1min，从消解仪上取下，热水充分溶解残渣。所得溶液为样品溶液。可从样品溶液中分取一部分，加入底液后测量样品极谱图。消解仪放置：恒温消解仪移出通风厨。在加入与消化样品等量的各种混酸的条件下，不加样品制备“空白溶液”。可从空白溶液中分取一部分，加入底液后测量空白极谱图。

　　3.2  消化温度的选择

　　硒是非金属元素，消化过程中硒酸易挥发使回收率降低，本文采用精密控制温度消化样品，消化温度大于175℃，样品中硒的回收率偏低，消化温度小于155℃，消化不完全，样品中硒的回收率也偏低，本文采用消化温度160℃，不同消化温度4h样品的回收率见表1。表1  不同消化温度4h样品的回收率（略）

　　3.3  消化时间的选择

　　实验表明，样品消化3h，消化不完全，在高氯酸介质中，4h可消化完全。

　　3.4  反应时间的选择

　　在高氯酸介质中，亚硫酸钠与四价硒生成硒硇，反应时间15min可以达到最大值。本文采用20min。

　　3.5  底液用量的选择

　　底液组成对峰电流影响较大，随碘酸钾溶液和混合试剂用量增加，峰电流就增大。经实验表明，用4.0ml底液能够满足测定要求。

　　3.6  亚硫酸钠溶液要新配制,放置过久失效，则无硒峰电流产生。

　　3.7  碘酸钾溶液应临用时配制，放置过久，催化效率降低，使硒峰电流下降。底液中加入氨水，可防止碘酸钾分解。

　　3.8  线性范围及检出限  实验表明,硒浓度在0.0005mg/kg～0.008mg/L范围内与峰电流呈线性，标准系数为0.9990,检出限为.0.0005g/L。

　　3.9  精密度与回收率  用本方法对含硒0.32mg/kg样品进行到10次平行实验，相对偏差为2.35%。对含硒0.320mg/kg和0.58mg/kg样品加硒标0.20mg/kg和0.30mg/kg，回收率见表2。
表2  食品中微量硒测定回收率实验测得液中硒含量（略）